BAPTA-AM is a calcium chelator that is cell-permeable and selective, blocking hERG, hKv1.3, and hKv1.5 channels (IC50=1.3/1.45/1.23 μM). BAPTA-AM has a 105-fold higher affinity for Ca2+ than for Mg2+, and can be used for the role of calcium in cell signaling.

Kv1.3 (human, HEK293 cells):1.45 μM, ERG channel (human, HEK293 cells):1.3 μM, Kv1.5 (human, HEK293 cells):1.23 μM

方法：软骨细胞用 BAPTA-AM (10 μM) 和 FAC (100 μM) 处理 24 h，使用 Reactive Oxygen Species Assay kit 检测细胞内 ROS 水平。
结果：FAC 促进 ROS 的产生，并且这种作用被 钙螯合剂 BAPTA-AM 抑制。[1]
方法：大鼠成纤维细胞 RAT2 和 Xenopus 细胞用 BAPTA-AM (50 μM) 处理 1 h，使用 Immunostaining 检测微管解聚情况。
结果：BAPTA AM 处理 30 min 后在大多数细胞中几乎完全解体，并且微管在 60 min 内在细胞中均匀解聚。[2]

方法：为研究对乙醇诱导的运动活性的影响，将 BAPTA-AM (0-10 mg/kg，Cremophor EL 1.25% (v/v) in distilled water) 腹腔注射给 Swiss (RjOrl) 小鼠，30 min 后注射 ethanol (0-4 g/kg)。
结果：用 BAPTA-AM 预处理可以在不改变基础运动的情况下阻止乙醇产生的运动刺激。相反，BAPTA-AM 逆转了乙醇诱导的催眠作用。[3]
方法：为研究对 LPS 诱导的血脑屏障渗漏的影响，将 BAPTA-AM (12 mg/kg，0.01% pluronic acid in sterile saline) 静脉注射给 FVB 小鼠，30 min 后腹腔注射 LPS (25 mg/kg)。
结果：BAPTA-AM 可减少 LPS 诱导的血脑屏障渗漏。[4]

使用方法
一、溶液配置
1.配制 BAPTA-AM 储存液：使用无水 DMSO 溶解 BAPTA-AM，配制成 50 mM 的储存液；（建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存）。
2.工作液配置：将 BAPTA-AM 储存液稀释至细胞培养基中，使终浓度达到 6-50 μM。
二、细胞准备
1.将细胞培养至适当的密度，对于贴壁细胞，可种植于培养皿或培养板中；对于悬浮细胞，调整细胞浓度至2×10^6个/mL。
2.将细胞与 BAPTA-AM 溶液共同孵育，通常在37℃、5% CO₂ 的条件下孵育 30-60 分钟，期间可轻轻振荡。
3.去除多余染料：孵育完成后，用无钙缓冲液洗涤细胞，去除未进入细胞的 BAPTA-AM。
4.对于贴壁细胞，可直接用无钙 PBS 洗涤；对于悬浮细胞，需离心收集细胞后再用无钙 PBS 重悬。
5.检测钙离子浓度变化：可根据实验需求，选择合适的检测方法：
荧光显微镜检测：观察细胞内荧光强度的变化，荧光强度的降低表示钙离子浓度的降低。
流式细胞术检测：通过流式细胞仪分析细胞内荧光强度的变化。
荧光光谱仪检测：测量细胞悬液的荧光强度变化。