7ACC1 (D 142) selectively affects a single part of the MCT symporter translocation cycle, leading to strict inhibition of lactate influx. This singular activity is associated with antitumor effects less prone to resistance and side effects.

7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid对乳酸摄入的影响研究发现，在使用氧化癌细胞进行的实验中，这些细胞已知能够维持其体外乳酸作为能量燃料的摄取能力，而对于高度糖解的细胞，该化合物对乳酸排出没有影响。相应地，在表达MCT1和MCT4亚型的氧化人类宫颈癌细胞SiHa和Hela中，7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid显著抑制了乳酸摄入和细胞增殖，而公认的MCT1/MCT2抑制剂AR-C155858未能如此。7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid 在表达MCT1/4的咽部鳞状FaDu肿瘤细胞中的效果得到了确认。这些观察结果强烈表明，7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid 通过MCT1和MCT4抑制乳酸的进入，抑制MCT1（乳酸摄取的主要途径），防止了任何补偿性效应。

7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid被设计用于选择性干扰富含乳酸的肿瘤微环境中的乳酸流动。该化合物家族的两种化合物的药理特性，包括其对乳酸进出口和抗肿瘤活性的影响，通过使用人类癌症细胞系和小鼠异种移植模型进行了研究。7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid意外地抑制了表达MCT1和MCT4转运蛋白的肿瘤细胞中的乳酸进口，但不抑制乳酸出口。7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid延缓了宫颈SiHa肿瘤、结肠HCT116肿瘤和原位MCF-7乳腺肿瘤的生长。通过不表达功能性MCT的膀胱UM-UC-3癌细胞缺乏活性，确认了MCT目标的结合。7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid还抑制了使用顺铂治疗后SiHa肿瘤的复发。最后，我们发现，与AR-C155858不同，7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid没有阻止底物模拟药物3-溴丙酸（3BP）通过MCT1进入细胞，并有助于在3BP治疗后抑制肿瘤复发。

使用方法:
一、溶液制备
1.储备液：将 7ACC1 溶解于适当的有机溶剂（如 DMSO）中，通常制备为 1–10 mM 的储备液。
2.工作液：根据实验需要，将储备液稀释至所需的工作浓度，通常为 0–50 µM，使用实验缓冲液（如 PBS，pH 7.4）进行稀释。
二、 应用步骤
细胞培养实验
(1) 细胞类型：7ACC1 主要用于肾癌细胞、乳腺癌细胞及其他癌细胞系的研究。
(2) 处理方法：将 7ACC1 加入到细胞培养基中，培养细胞 24–96 小时，根据需要调整浓度。
(3) 细胞功能检测：
a.增殖检测：可使用 MTT 或 CCK-8 法检测细胞增殖。
b.迁移与侵袭检测：通过划痕实验或 Transwell 实验评估细胞的迁移和侵袭能力。
c.MCT-1/MCT-4 表达检测：使用 Western blot 或 qPCR 方法检测 MCT-1/MCT-4 的蛋白或 mRNA 表达水平。
d.乳酸浓度检测：使用乳酸测定试剂盒检测细胞培养液中的乳酸含量。
动物实验
(1) 处理方式：通过腹腔注射或口服给药的方式，将 7ACC1 注射或给予实验小鼠。剂量根据实验设计，通常为 10–50 mg/kg。
(2) 肿瘤抑制实验：通过肿瘤大小的测量，评估 7ACC1 对肿瘤生长的抑制作用。
(3) 免疫组织化学分析：对肿瘤组织进行免疫组化分析，检测 MCT-1/MCT-4 表达水平及乳酸积累情况。
3. 校准与对照
（1）对照组：设置未处理的细胞或动物组作为对照，以验证 7ACC1 的效应。
（2）标准曲线：在乳酸浓度检测实验中，建立标准曲线以校准乳酸浓度与荧光信号之间的关系。
注意事项
（1）溶解性：7ACC1 在 DMSO 中具有良好的溶解性，使用时应避免溶液中残留未溶解的固体。
（2）储存条件：7ACC1 应储存于 -20°C 避光环境下，避免反复冻融。
（3）细胞毒性：尽管 7ACC1 对癌细胞具有抑制作用，但高浓度下可能会对正常细胞产生毒性，应根据实验需求调整浓度。
（4）光敏性：7ACC1 可能对光敏感，实验过程中避免直接光照。

Eight-week-old NMRI female nude mice (Elevage Janvier) were injected subcutaneously with 2 × 106 SiHa cells, 2 × 10^6 HCT-11^6 cells, or 5 × 10^6 UM-UC-3 cells. An orthotopic breast cancer model was also used with MCF-7 tumor cells injected into the mammary fat pad of mice; a 17β-estradiol pellet had first been subcutaneously implanted in these mice as previously described . When tumors reached a mean diameter of 5 mm, 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid compounds (3 mg/kg) or AR-C155858 (3 mg/kg) were daily injected intraperitoneally; in some experiments, 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid treatment was combined with cisplatin (5 mg/kg) injected intraperitoneally at days 0 and 7 (7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid administered daily except at days 0 and 7) or 3BP(3 mg/kg) injected i.p. from day 0 to 4 and day 7 to 11 (7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic acid administered together with 3BP). Cisplatin and 3BP were also administered alone and control mice were injected with vehicle (dimethyl sulfoxide). Tumor sizes were tracked with an electronic calliper and determined using the formula: (length × width^2 × π)/6.