使用方法
一、神经逆行示踪

1. 材料准备：
   Hydroxystilbamidine（通常配制为 2% 溶液）。
   溶剂：生理盐水、蒸馏水，或根据实验需要的缓冲液（如 PBS）。
   辅助材料：注射器或微量注射装置。
   2.步骤：
   (1)制备工作溶液：配制 2% Hydroxystilbamidine 溶液，可以通过无菌过滤处理。
   注意事项：建议避光操作，以防止荧光信号衰减。
   (2)注射染料：在目标神经或组织区域注射染料。
   注意事项：使用微量注射器，以减少对周围组织的损伤。
   (3)逆行运输：注射完成后，等待 24-72 小时，以便染料通过神经末梢逆行运输到胞体。
   (4)组织取样：动物处死后，取出感兴趣的组织进行固定（通常用 4% PFA）。切片后进行荧光显微镜观察。
   二、组织化学染色
2. 材料准备：
   （1）Hydroxystilbamidine 溶液（建议 1-10 μM）。
   （2）细胞或组织样品。
   （3）DAPI 或其他荧光对照染料（可选）。
3. 步骤：
   （1）固定和透化：
   （2）用 4% PFA 固定细胞或组织。
   （3）用 0.1-0.5% Triton X-100 透化细胞膜。
4. 染色：
   （1）将样品浸入 Hydroxystilbamidine 溶液中，避光孵育 10-30 分钟。
   （2）洗涤 2-3 次以去除未结合染料。
   （3）显微镜观察：使用合适的荧光显微镜，通常在 365 nm（紫外激发）下观察荧光。
   注意事项：
   （1）避光储存：Hydroxystilbamidine 易受光降解，溶液应避光保存，推荐 4℃ 保存短期，-20℃ 冷冻保存长期。
   （2）操作安全：避免直接接触皮肤或吸入，应佩戴防护装备。
   （3）实验优化：根据样本类型和实验目标调整浓度及孵育时间。

Hydroxystilbamidine在给予绵羊红细胞(SRBC)刺激前作为有效的斑点形成细胞(PFC)反应抑制剂。在整个实验过程中，处理过的小鼠中观察到的PFC数量较少，但随着时间推移，抑制水平逐渐降低。到第14天，Hydroxystilbamidine处理过的小鼠与对照组的PFC数量基本上处于背景水平[2]。