MFO Assay Kit (Spectrophotometry)

MFO催化对硝基苯甲醚产生对硝基苯酚，在400nm下有特征吸光值。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水、氯仿。

二、酶液提取：
按照组织质量（g）：CB0217S-ES（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2.操作表（在10mL管中依次加入如下试剂）

四、MFO活性计算：
标准曲线：y = 0.0238x + 0.0021，R² = 0.9997；y，吸光度；x,标准品浓度，单位nmol/mL。
1.按样本质量计算：
单位定义：每g样本每分钟产生1nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
MFO (nmol/min/g 鲜重) = (ΔA-0.0021)÷0.0238×V总÷(V样÷V样总×W)÷T =4.2×(ΔA-0.0021)÷W
2.按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
MFO (nmol/min/mg prot) = (ΔA-0.0021)÷0.0238×V总÷(V样×Cpr)÷T =4.2×(ΔA-0.0021)÷Cpr
注：V总：最终萃取液体积，1.5 mL；V样：反应中样品体积，500μL；T：反应时间，30min；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。