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常见问题解答
MFO Assay Kit (Microanalysis)
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产品编号 CB0217M
别名 总多功能氧化酶检测试剂盒（微量法）
多功能氧化酶（Multifunctional oxidase）又称混合功能氧化酶，可产生降解反应，可使原化学物质变为低毒的或无毒的物质从体内排出；还可产生激活反应，可使原化学物质转化为具有亲电子性质，导致毒性增强，成为致突变物或终致癌物。近年来对混合功能氧化酶系与外源性化学物质相互作用的深入研究，对于从分子生物学水平上进一步了解外源性化学物质的毒作用具有重要意义。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 2,160 | 10-12日内发货 |
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检测原理
MFO催化对硝基苯甲醚产生对硝基苯酚，在400nm下有特征吸光值。
产品规格
100T/96S规格的产品组成及保存条件：
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0217M-ES | 120ml×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0217M-A | 24ml×1瓶 | 4℃避光保存 |
| CB0217M-B | 粉剂×3管 | -20℃保存；临用前取一管加入2mL水溶解，现配现用 |
| CB0217M-C | 24mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0217M-D | 64mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0217M-Standard | 1ml×1瓶 | 4℃保存 |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
操作说明
一、自备用品：
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、蒸馏水、氯仿。
二、酶液提取：
按照组织质量（g）：CB0217M-ES（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
三、测定步骤：
1.酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm。
2.操作表（在EP管中依次加入如下试剂）：
| 试剂名称 | 测定管（µL） | 空白管（µL） | 标准管（µL） |
|---|---|---|---|
| CB0217M-A | 200 | 200 | |
| CB0217M-B | 40 | 40 | |
| 提取液 | 160 | 360 | |
| 样本 | 200 | ||
| 混匀，37℃水浴30min | |||
| CB0217M-C | 200 | 200 | |
| 氯仿 | 1000 | 1000 | |
| 充分混匀萃取，静置10min，取下层氯仿层0.6mL至新的管中 | |||
| 萃取液 | 600 | 600 | |
| 标准品 | 600 | ||
| CB0217M-D | 600 | 600 | 600 |
| 充分混匀萃取，取上层水相0.2mL于96孔板中，400nm下测定吸光值A测定与A空白，ΔA=A测定-A空白。空白管和标准管各只需测1-2次。 | |||
四、MFO活性计算：
标准曲线：y = 0.0119x + 0.0021，R2 = 0.9997；y，吸光度；x，标准品浓度，单位nmol/mL。
1.按样本质量计算：
单位定义：每g样本每分钟产生1nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
MFO(U/g鲜重)=ΔA÷A标准
MFO (U/g 鲜重) = (ΔA-0.0021)÷0.0119×V总÷(V样÷V样总×W)÷T =8.4×(ΔA-0.0021)÷W
2.按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
MFO (U/mg prot) = (ΔA-0.0021)÷0.0119×V总÷(V样×Cpr)÷T =8.4×(ΔA-0.0021)÷Cpr
注：V总：最终萃取液体积，0.6 mL；V样：反应中样品体积，200μL；T：反应时间，30min；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。
注意事项
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
引用文献
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