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50 T

¥ 792

10-12日内发货

产品规格

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0119S-A	30ml×1 瓶	4℃保存；
CB0119S-B	30ml×1瓶	4℃保存；
CB0119S-C	自备	试验前1天，取25ml玻璃瓶，加入12ml正庚烷，0.5ml无水甲醇，12.5ml氯仿，盖紧后混匀，室温保存。
CB0119S-D	10ml×1瓶	室温保存
CB0119S-E	粉剂×1支	4℃避光保存；
CB0119S-Standard	粉剂×1支	室温避光保存，临用前把试剂转移到10ml的玻璃瓶，加入7.8ml氯仿充分溶解，即为500μmol/L的棕榈酸标准液。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计、1ml石英比色皿、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水。

二、粗酶液提取：
1.血液中HL活性测定：按动物体重，150U/kg肝素钠溶液静脉注射，20分钟后取血液，即下表中的粗酶液。
2.组织中HL活性测定：组织用生理盐水冲洗干净后，用吸水纸吸取表面水分，称取0.1g，加入1ml生理盐水，冰浴匀浆，8000rpm，4℃离心10分钟，取上清液，即粗酶液，待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30分钟，调节波长550nm，蒸馏水调零。
2.检测样本制备：

试剂名称	检测样本管（µL）
粗酶液	50
CB0119S-A	500
CB0119S-B	500
盖紧后充分振荡混匀，37℃水浴准确保温60分钟，即为检测样本，进行下一步实验。

3.取带盖玻璃试管中按照下表操作

试剂名称	空白管（µL）	标准管（µL）	测定管（µL）
双蒸水	200
标准液		10
检测样本			10
CB0119S-C	500	500	500
CB0119S-D	200	200	200
CB0119S-E	200	200	200
	盖紧后充分振荡混匀，倒入1ml玻璃比色皿，静置15分钟，于550nm测光吸收，
	记为A空白管。	记为A标准管。	记为A肝酯酶

四、HL活力计算：
1.血液中HL活力计算
活性单位定义：37℃中每毫升血清(浆)每分钟在反应体系中所产生的1μmolFFA。
肝酯酶 (HL) 活性 (U/ml) = [C标准液÷(A肝酯酶-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V反总÷(V样÷V样总)÷T=0.7×(A肝酯酶-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
注： C标准液：0.5 μmol/mL；V反总：催化反应体系总体积，1.05mL；V样：粗酶液体积，50μL；V样总：粗酶液总体积，1000μL；T：反应时间，15分钟。
2.组织中HL活性计算
37℃中每毫克蛋白每分钟内催化产生1 μmol FFA。
肝酯酶 (HL) 活性 (U/mg) = 0.7×(A肝酯酶-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr
注： Cpr: 粗酶液蛋白质浓度，mg/mL。

Hepatic Lipase Assay Kit (Spectrophotometry)

检测原理

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