常见问题解答问Cocktail 系列的使用方法?
答在室温下解冻,开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。然后在实验前以 1:100(v/v)稀释至溶液样品(细胞裂解液或组织提取液)。
问在做加药实验时,药物对 CCK8 测定是否有影响?如何解决?
答有时会有影响。如果药物具有还原性,会和 CCK-8 发生显色反应,增加吸光度。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入 CCK-8,测定 450 nm 的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基 (加 CCK-8)的吸光度高,则证明药物有影响,可在加 CCK-8 之前更换培养基,去掉药物的影响。
问蛋白酶抑制剂 cocktail C0001 使用时加到蛋白液中的有效抑制时间有多久?
答这个我们暂时没有准确的数据,因为它对不同样品不同蛋白的保护程度是不一样的。一般单次提取以后,不加蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白会在 24 h 后发生明显降解,加了蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白可以维持 48 h 不降解。如果提取后置于 -20℃ 储存的话,一般加了蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白可以至少储存一个月,冻融三次;但时间长了或者冻融次数多了的话,蛋白还是会发生降解的,不同蛋白降解时间不一样的。
问三款 RIPA 裂解液有什么区别?
答RIPA 裂解液(强)、RIPA 裂解液(中)、RIPA 裂解液(弱)的有效裂解成分、裂解强度不同,建议查询官网,有三款RIPA裂解液的比较表。
问三种磷酸酶抑制剂cocktail的区别
答成分功能均不一样,具体信息可在官网进行查询。用哪个需要根据老师的实验需求确定。C0002的抑制范围会相对C0003广泛一点,如果只想买一支又不确定哪个合适的话,推荐C0002。如果想要更全面的抑制,推荐C0004。
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