【TargetMol 明星分子】- Enzalutamide: 揭示雄激素受体信号与自噬耦合的关键利器

1. 背景介绍

Enzalutamide (T6002)，CAS: 915087-33-1 是一种高选择性雄激素受体（AR）拮抗剂，在 LNCaP 细胞中的 IC50 为 36 nM，适合在纳摩尔水平上精确干预 AR 信号。在经典通路中，二氢睾酮等配体与由 HSP90 伴侣维持的胞质 AR 结合，诱导受体活化、二聚、入核、结合雄激素反应元件（ARE），并招募 SRC/p160、p300/CBP 等共激活因子，从而驱动 KLK3/PSA、TMPRSS2、FKBP5 等靶基因转录。Enzalutamide 通过占据 AR 配体结合域，阻断配体诱导的构象改变，进而抑制入核、DNA 结合及共激活子招募，导致 AR 依赖性转录与增殖的快速、持久抑制。这一点在多种前沿研究与二代 AR 拮抗剂的奠基性研究中得到验证[1,2]。 除直接封闭转录外，Enzalutamide 还将 AR 拮抗与自噬过程相联动。自噬由 ULK1–ATG13–FIP200 起始复合体与 Beclin-1–VPS34（III 类 PI3K）成核复合体主导，经 ATG7/ATG3 介导的 LC3 脂化与 SQSTM1/p62 周转形成自噬小体，并受 AMPK–mTOR 轴整体调控。Enzalutamide 可激活自噬，在 AR 依赖性体系中促进自噬通量。实验上可通过 LC3-II 蛋白累积、GFP-LC3 斑点、mRFP-GFP-LC3 双荧光探针以及 p62 降解进行定量监测。该自噬诱导为研究 AR 通路抑制伴随的代谢与蛋白稳态重编程提供直接读出，也为解析类固醇受体转录控制与 AMPK–mTOR–ULK1 轴之间的互作提供切入点。 基于上述双重作用，Enzalutamide 在研究中的用途广泛。其一，可用于在雄激素依赖性与“间质增生（desmoplasia）抵抗”前列腺癌模型中瞬时关闭 AR 信号，结合转录组与染色质图谱技术解析 AR cistrome、增强子重塑及辅因子依赖性。其二，借助其自噬激活效应，开展与自噬调控剂的组合干预，界定 AR 封闭后的适应性压力反应与生存弱点。其三，依托其显著的抗肿瘤活性，在功能基因组学筛选（如 CRISPR/shRNA 在药压下的脱落筛）中识别 AR 依赖性的决定因子与缓冲/放大节点。其四，凭借高选择性与高效力，适用于细胞与异种移植体系统的定量药理学研究，将 AR 靶点占领与转录、代谢及生长表型精确关联，尤其适用于“间质增生抵抗”前列腺癌模型[1,2]。综上，Enzalutamide 是解析 AR 驱动转录及其与自噬介导的细胞稳态耦合的关键化学工具。

2. 文献分享

2.1 ARv7 promotes the escape of prostate cancer cells from androgen deprivation therapy-induced senescence by mediating the SKP2/p27 axis

▲ 通过在LNCaP细胞中给予Enzalutamide（10 µM，72小时）处理，经SA-β-gal活性检测定量衰老阳性细胞、流式细胞术分析细胞周期分布、EdU掺入实验评估DNA复制活性、Annexin V/PI染色检测凋亡及Western blot检测p27蛋白表达，证实Enzalutamide可诱导LNCaP细胞衰老并伴随p27激活。

Enzalutamide (T6002) 在本研究中被用于评估其在去雄激素相关条件下对前列腺癌细胞的作用。证据显示，在接受Enzalutamide处理的模型中，p27水平均显著升高，提示该药物在实验体系中激活了与衰老相关的关键细胞周期调控因子。此外，在去除了ARv7的22Rv1细胞中，Enzalutamide处理后出现更多的衰老细胞，且EdU阳性细胞减少，表明在这一背景下，Enzalutamide促进了与细胞衰老相关的生长停滞并抑制DNA复制活性。综合来看，这些结果表明，Enzalutamide在所测试的细胞中上调p27，并且在ARv7被敲低的22Rv1细胞里促进衰老表型的增强与复制活性的下降。[3]

2.2 Granulin + macrophages promote lineage plasticity in prostate cancer through paracrine signaling loops

▲ Enzalutamide 可显著抑制前列腺癌类器官的生长与活力，而 GRN 的存在会削弱其这一抑制作用。

Enzalutamide (T6002) 在本研究中被界定为一种作用于雄激素受体的药物。研究者利用类器官体系考察肿瘤微环境因素对 Enzalutamide 反应的影响，并以 granulin 为重点变量。实验中，类器官接受 Enzalutamide 单独处理或与重组人源 granulin 蛋白联合处理，以构建检验 granulin 是否影响药物反应的条件。结果明确显示，类器官耐药性实验表明 granulin 驱动了对 Enzalutamide 的耐受，直接将免疫相关因子与该药物的反应降低联系起来。由此，Enzalutamide 在本研究中作为 AR 靶向药物出现，其对类器官的作用在存在 granulin 时表现出耐受性的增强，这一结论基于设计用于评估药物反应的类器官实验所获得的证据。[4]

2.3 NSD2 maintains lineage plasticity and castration-resistance in neuroendocrine prostate cancer

▲ 通过在NSD2敲除或对照的神经内分泌前列腺癌类器官及皮下移植瘤模型中给予Enzalutamide处理，经剂量-响应曲线计算IC₅₀、体内肿瘤生长曲线监测、H&E和免疫荧光分析（CHGA、HA）、scATAC-seq染色质可及性分析及GSEA富集分析，证实NSD2抑制可恢复神经内分泌前列腺癌对Enzalutamide的敏感性。

Enzalutamide (T6002) 在多种类器官与移植模型中被系统评估。研究首先指出，在神经内分泌类器官与移植物中，NSD2 抑制可恢复对 Enzalutamide 的应答。实验在 Nsd2 缺失或对照的 NPPO-1NE、NPPO-2 类器官，以及对照或 H3.3K36M 转染的 NPPO-4、NPPO-6 类器官中进行 Enzalutamide 剂量-反应分析，并通过非线性回归计算 IC50；同时在 NSD2 缺失或对照的 MSKPCa10 类器官中也完成了 Enzalutamide 剂量-反应与 IC50 计算。体内方面，研究绘制了对照与 NSD2 缺失 MSKPCa10 皮下异种移植在 Enzalutamide 或 DMSO 处理下的肿瘤生长曲线；各队列在移植两周后，按日灌胃给予 10 mg/kg Enzalutamide，鼠源移植物持续 14 天，人源移植物持续 56 天。在类器官层面，研究在 10 µM Enzalutamide 存在下进行全装片成像，并在 MSKPCa10 类器官上于 3.5 µM 与 10 µM Enzalutamide 条件下评估生长。另有实验专门记录了在 NSD2 抑制与 Enzalutamide 联合条件下的类器官应答与移植物应答。这些结果通过剂量-反应、体内生长曲线以及成像和生长评估，明确了 Enzalutamide 的实验活性，并显示与 NSD2 抑制相关的应答恢复。[5]

3. 结语

Enzalutamide 是一种高效、高选择性的雄激素受体（AR）拮抗剂，通过占据 AR 配体结合域，阻断受体入核、DNA 结合及共激活子招募，从而快速且持久地抑制 AR 依赖的转录和细胞增殖。同时，Enzalutamide 激活自噬通路，介导 AMPK–mTOR–ULK1 轴，实现 AR 信号抑制与细胞稳态的耦合。文献报道表明，Enzalutamide 在前列腺癌细胞中上调细胞周期调控因子 p27，促进细胞衰老；与 NSD2 抑制剂联合可逆转耐药并增强凋亡；且肿瘤微环境中的 granulin 可驱动对 Enzalutamide 的耐受性。未来研究可聚焦于联合调控自噬及表观遗传因子的策略，深入解析 AR 与自噬信号通路的相互作用，并利用 Enzalutamide 在更复杂的前临床模型中探索克服耐药的新方法。

4. Q&A

Q1: Enzalutamide 抑制雄激素受体活性的主要机制是什么？

A1: Enzalutamide 通过占据 AR 配体结合域，阻断配体诱导的构象变化，抑制受体入核、DNA 结合及共激活子招募，进而抑制 AR 依赖的转录和细胞增殖。

Q2: Enzalutamide 如何影响 AR 依赖体系中的自噬？

A2: Enzalutamide 通过激活 AMPK–mTOR–ULK1 信号轴，促进自噬通量的增加，可通过 LC3-II 蛋白累积、GFP-LC3 斑点形成及 p62 降解等指标进行监测。

Q3: 关于 Enzalutamide 与 NSD2 抑制联合应用的研究有哪些重要发现？

A3: NSD2 抑制可恢复前列腺癌耐药模型对 Enzalutamide 的敏感性，二者联合协同抑制肿瘤生长，诱导浓度依赖性的细胞凋亡，并在体内模型中引起广泛坏死和纤维化。

5. 参考文献

[1] Tran C, Ouk S, et al. Development of a second-generation antiandrogen for treatment of advanced prostate cancer. Science. 2009;324(5928):787-90.

[2] Scher HI, Fizazi K, et al. Increased survival with enzalutamide in prostate cancer after chemotherapy. N Engl J Med. 2012;367(13):1187-97.

[3] Zhuang D, Kang J, Luo H, Tian Y, Liu X, Shao C. ARv7 promotes the escape of prostate cancer cells from androgen deprivation therapy-induced senescence by mediating the SKP2/p27 axis. BMC Biology. 2025;23(1):.

[4] Zhu Z, Zhang M, Song Y, Jiang W, Cao F, Yao Y, et al.. Granulin + macrophages promote lineage plasticity in prostate cancer through paracrine signaling loops. . 2025;():.

[5] Li J, Vasciaveo A, Karagiannis D, Sun Z, Chen X, Socciarelli F, et al.. NSD2 maintains lineage plasticity and castration-resistance in neuroendocrine prostate cancer. . 2023;():.